少量のRNAからの大量cDNA調製テクニック

チャムRNA
サンプルRNAが少量だと、RTaseで逆転写されない。(基質濃度がうすいため、らしい)
ダミーのRNAを大量に入れておくと、見かけ基質量が増えるので、RTaseが働いてくれる。そのドサクサなのか知らないが、少量入っている本来のサンプルRNAも一緒に逆転写してくれるようになる。
ホントかウソかわからないような話。


NuGEN Ribo-SPIA
ds cDNAを作ったあとに、poly-Tプライマー(poly-dTではない)を使ってDNAポリメラーゼで相補鎖を伸長させるのがミソ。
poly-TプライマーはRNAなので、伸長の頭はRNaseHで分解される。そうすると次のpoly-Tがやってきて、新しく伸長が始まる。このサイクルで増幅される。